[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: درباره نشريه :: صفحه اصلي :: آخرين شماره :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 28، شماره 5 - ( 10-1399 ) ::
جلد 28 شماره 5 صفحات 10-1 برگشت به فهرست نسخه ها
مطالعه تجربی بیان Ki67، POU5F1 و zbtb16 در سلول های بیضه خوک و موش با استفاده از روش ایمنوسیتوشیمیایی و RT-PCR
حسین عزیزی* 1، امیررضا نیازی تبار2، عطیه محمدی2
1- گروه زیست فناوری میکروبی، دانشکده زیست فناوری، دانشگاه تخصصی فناوری های نوین آمل، آمل، ایران ، hosseinazizi1358@gmail.com
2- گروه زیست فناوری میکروبی، دانشکده زیست فناوری، دانشگاه تخصصی فناوری های نوین آمل، آمل، ایران
چکیده:   (1979 مشاهده)
مقدمه: سلول های بنیادی اسپرم ساز، بنیانگذار و نقطه شروع اسپرماتوژنز هستند و تنها سلول هـای بنیـادی در بـدن بـه شـمار مـی آینـد کـه می توانند از طریق گامت زایی اطلاعات ژنتیکی را به نسل بعدی منتقل کنند؛ هدف از تحقیق حاضر، بررسی ماهیت پرتوانی سلول های بنیادی اسپرم ساز در شرایط in vitro و in vivo است.
مواد و روش ‌ها: سلول های اسپرم ساز از بیضه خوک و موش با استفاده از روش هضم آنزیمی استخراج شده و در محیط حاوی FGF، EGF و GDNF و سلول های تغذیه کننده STO کشت داده شدند. سپس برای بررسی ایمنوسیتوشیمیایی و RT-PCR کلونی های حاصله از مارکرهای Ki67، POU5F1 و ZBTB16 استفاده شد.
یافته ‌های پژوهش: ماهیت سلول های بنیادی اسپرماتوگونی حاصــله پس از جداسازی و کشت، به وسیله معیار هایی نظیر رشد خوشه ای کلنی ها در محیط کشت، بیان مارکر Ki67 طی بررسی ایمنوسیتوشیمیایی که بیانگر قابلیت تکثیر است و شاخص های مورفولوژیکی مشاهده شده با میکروسکوپ الکترونی نگاره، ثابت شد. هم چنین آنالیز مقایسه بیان مارکر های POU5F1 و ZBTB16 در سلول های بنیادی جنینی، سلول های بنیادی اسپرم ساز و سلول های سرتولی موجود در لوله اسپرم ساز موش با استفاده از روش RT-PCR را در نشان داد.
بحث و نتیجه گیری: طی این پژوهش بیان مارکر هایKi6 ، POU5F1 و ZBTB16 در لوله اسپرم ساز و ویژگی های سیتولوژیک سلول های بنیادی اسپرم ساز مورد مطالعه قرار گرفت به طوری که یافته های حاصل می تواند در تحقیقات پیشرفته حوزه بیولوژی تولید مثل مفید باشد.
واژه‌های کلیدی: سلول های بنیادی پرتوان، سلول های بنیادی موش، سیتولوژی، پروتئین Pou5f1، zbtb16
متن کامل [PDF 961 kb]   (719 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی
دریافت: 1398/10/2 | پذیرش: 1399/3/10 | انتشار: 1399/10/10
فهرست منابع
1. Kanbar M, Michele F, Wyns C. Cryostorage of testicular tissue and retransplantation of spermatogonial stem cells in the infertile Male. Best Pract Res Clin Endocrinol Metab2018; 4:124-9. doi. 10.1016/j.beem.2018.10.003.
2. Raymond K. Adhesion within the stem cell niches. Curr Opin Cell Biol2009;21: 623-9. doi. 10.1016/j.ceb.2009.05.004.
3. Wu X. Prepubertal human spermatogonia and mouse gonocytes share conserved gene expression of germline stem cell regulatory molecules. Proce National Acad Sci2009. 106: 21672-21677. doi. 10.1073/pnas.0912432106.
4. Fayomi AP, Orwig KE. Spermatogonial stem cells and spermatogenesis in Mice monkeys and men. Stem Cell Res2018; 29: 207-14. doi. 10.1016/j.scr.2018.04.009.
5. Hayashi Y, Saitou M, Yamanaka S. Germline development from human pluripotent stem cells toward disease modeling of infertility. Fertil Steril 2012; 97: 1250-9. doi. 10.1016/j.fertnstert.2012.04.037.
6. Hermann BP. The mammalian spermatogenesis single cell transcriptome, from spermatogonial stem cells to spermatids. Cell Rep 2018; 25: 1650-1667. e8.
7. Silber S. Histology of the testis and spermatogenesis. Fund Male Infertil 2018;2: 29-37. doi. 10.1016/j.celrep.2018.10.026.
8. Sharma S, Hanukoglu A, Hanukoglu I. Localization of epithelial sodium channel ENaC and CFTR in the germinal epithelium of the testis sertoli cells and spermatozoa. J Mole Histol 2018; 49: 195-208. doi. 10.1007/s10735-018-9759-2.
9. Griswold MD. 50 years of spermatogenesis sertoli cells and their interactions with germ cells. Biol Rep 2018;99: 87-100. doi. 10.1093/biolre/ioy027.
10. Gerber J, Heinrich J, Brehm R. Blood-testis barrier and sertoli cell function lessons from SCCx43KO Mice. Reproduction 2016; 151:15-27. doi. 10.1530/REP-15-0366.
11. Mateus I. Glucose and glutamine handling in the sertoli cells of transgenic rats overexpressing regucalcin: plasticity towards lactate production. Sci Rep2018; 8: 10321. doi. 10.1038/s41598-018-28668-4.
12. Culty M, Papadopoulos V, Zirkin B. Leydig cells fetal to aged testes. Enc Rep2018;2: 39. doi. 10.1016/b978-0-12-801238-3.64360-x.
13. Lee WY. Characterization of male germ cell markers in canine testis. Anim Rep Sci 2017; 182: 1-8. doi. 10.1016/j.anireprosci.2017.01.002.
14. Azizi H, Skutella T, Shahverdi A. Generation of mouse spermatogonial stem cell colonies in a non-adherent culture. Cell 2017; 19: 238. doi. 10.22074/cellj.2016.4184.
15. Michele F, Vermeulen M, Wyns C. Fertility restoration with spermatogonial stem cells. Curr Opin Endocrinol Diabete Obesit2017; 24: 424-31. doi. 10.1097/med.0000000000000370.
16. Guo J, Cairns BR. Isolation and enrichment of spermatogonial stem cells from human testis tissues. Curr Pro Stem Cell Biol 2019; 3:77. doi. 10.1002/cpsc.77.
17. Oatley JM, Oatley MJ. Feeder free method for culture of bovine and porcine spermatogonial Stem Cells 2016; 3:231-6. doi. 10.1016/j.scr.2013.08.008.
18. Luo J, Megee S, Dobrinski I. Asymmetric distribution of UCH‐L1 in spermatogonia is associated with maintenance and differentiation of spermatogonial stem cells. J Cell Physiol 2009; 220: 460-8. doi. 10.1002/jcp.21789.
19. Kokkinaki M. Age affects gene expression in mouse spermatogonial stem progenitor cells. Reproduction2010;139: 1011-20. doi. 10.1530/REP-09-0566.
20. Giassetti MI, Ciccarelli M, Oatley JM. Spermatogonial stem cell transplantation: insights and outlook for domestic animals. Annu Rev Anim Biosci2019; 7: 385-401. doi. 10.1146/annurev-animal-020518-115239.
21. Morimoto H. ROS amplification drives mouse spermatogonial stem cell self-renewal. Life Sci Allia2019; 2:121-6. doi. 10.26508/lsa.201900374.
22. Zhou H. The testicular soma of Tsc22d3 knockout mice supports spermatogenesis and germline transmission from spermatogonial stem cell lines upon transplantation. Genesis 2019;2:23295. doi. 10.1002/dvg.23295.
23. Moraveji SF. Optimizing methods for human testicular tissue cryopreservation and spermatogonial stem cell isolation. J Cell Biochem 2019;120: 613-21. doi. 10.1002/jcb.27419.
24. Kubota H, Avarbock MR, Brinster RL. Culture conditions and single growth factors affect fate determination of mouse spermatogonial stem cells. Biol Rep 2004;71: 722-31. doi. 10.1095/biolreprod.104.029207.
25. Valli H. Fluorescence and magnetic activated cell sorting strategies to isolate and enrich human spermatogonial stem cells. Fertil Steril 2014; 102: 566-80. doi. 10.1016/j.fertnstert.2014.04.036.
26. Panda RP, Barman H, Mohapatra C. Isolation of enriched carp spermatogonial stem cells from Labeo rohita testis for in vitro propagation. Theriogenology2011; 76: 241-51. doi. 10.1016/j.theriogenology.2011.01.031.
27. Grisanti L. Identification of spermatogonial stem cell subsets by morphological analysis and prospective isolation. Stem cells 2009; 27: 3043-52. doi. 10.1002/stem.206.
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA



XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Azizi H, Niazi Tabar A, Mohammadi A. Experimental Investigation of Ki67, POU5F1, and ZBTB16 Expression in the Pig and Mouse Testicular Cells using Immunocytochemistry and RT-PCR. Journal of Ilam University of Medical Sciences 2020; 28 (5) :1-10
URL: http://sjimu.medilam.ac.ir/article-1-6238-fa.html

عزیزی حسین، نیازی تبار امیررضا، محمدی عطیه. مطالعه تجربی بیان Ki67، POU5F1 و zbtb16 در سلول های بیضه خوک و موش با استفاده از روش ایمنوسیتوشیمیایی و RT-PCR. مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام 1399; 28 (5) :10-1

URL: http://sjimu.medilam.ac.ir/article-1-6238-fa.html



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 28، شماره 5 - ( 10-1399 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام Journal of Ilam University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.15 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 4541