1- مرکز علم و فناوری زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران ، honari.hosein@gmail.com 2- مرکز علم و فناوری زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران
چکیده: (3139 مشاهده)
مقدمه:گزش عروس دریایی جعبه ای دردناک بوده و می تواند مهلک باشد. زهر گونه C. fleckeri حاوی انواع پروتئین های فعال زیستی است. دو مورد از فراوان ترین پروتئین های موجود در این گونه، CfTX-1 و CfTX-2 است که با استفاده از روش الکتروفورز یا کروماتوگرافی به راحتی قابل جداسازی نمی باشند. فناوری بیان نوترکیب، جایگزینی مناسب برای جداسازی پروتئین طبیعی زهر می باشد. هدف از این مطالعه، بیانپروتئین C-CfTX1-STxB در E.coli و بررسی آنتیژنیسیتی آن در موشسوری میباشد. مواد و روش ها:ژن کامل CfTX1 صناعی در پلاسمید pUC57 تهیه شد. قطعه CfTX-1C- به وسیلهPCR تکثیر و با جایگاه های آنزیمی BamHI وSalI در وکتور بیانی pET28a-stxB زیر همسانه سازی و به باکتری E.coli ترانسفورم شد. بیان ژن تحت القایIPTG انجام گردید. پس از تخلیص پروتئین و تزریق به موشسوری، میزان آنتیبادی تولید شده در سرم اندازه گیری شد. هم چنین موشها به وسیله زهر عروس دریایی Rhopilema nomadica چالش شدند. یافته های پژوهش:در این مطالعه تجربی، ژن C-CfTX1-STxB، کلون شده در وکـــتور بیانی pET28a(+) به وسیله PCR، توالی یابی و با آنالیز آنزیمی تایید گردید. هم چنین پروتئین نوترکیب تولید شده به وسیله وسترن تایید شد. آنتیبادی تولید شده در سرم، توسط تست الایزا کمیتسنجی شد. بحث و نتیجه گیری:موش های ایمن شده در چالشی پس از 60 روز، 50 برابر LD50 زهر عروس دریایی را تحمل مینمایند. با توجه به عدم خاصیت کاردیوتوکسیستی و نوروتوکسیستی پروتئین نوترکیب، این پروتئین تولید شده می تواند به عنوان کاندید واکسن زهر عروس دریایی در موش سوری یا در مراحل بعدی کارآزمایی بالینی برای انسان پیشنهاد شود.
Honari H, Aghaie S M, Hosseinzade M. Subcloning and Expression of the Chimeric Antigen
C-CFTX1-STxB of the Jellyfish Venom and
its Antigenicity Assessment in Syrian Mice. J. Ilam Uni. Med. Sci. 2019; 27 (5) :24-36 URL: http://sjimu.medilam.ac.ir/article-1-5331-fa.html
هنری حسین، آقایی سید مجتبی، حسین زاده مهدی. زیر همسانه سازی و بیان آنتی ژن کایمر C-CFTX1-STxB زهر
عروس دریایی و بررسی آنتی ژنیسیتی آن در موش سوری. مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام. 1398; 27 (5) :24-36