|
بررسی میزان بیان ژن ID1 در سلول های AGS ترنسفکت
شده با وکتور نوترکیب pFLAG-CMV3-tagD
|
مرضیه رستم زاده رنانی1  ، عباس دوستی 2 |
1- گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
2- مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران ، abbasdoosti@yahoo.com |
|
|
چکیده: (81 مشاهده) |
مقدمه: پروتئین ID، باعث افزایش تکثیر سلولی می شود و از طرفی تمایز را مهار کرده که ارتباط آن با روند تومورزایی روده را مشخص می کند. عفونت هلیکوباکتر با بیان ژن های مختلف ID در ارتباط است و بنا بر این هدف از این تحقیق بررسی بیان ژن ID1 در سلول های AGS ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب pFLAG-CMV-3-tagD است.
مواد و روش ها: در پژوهــش حاضر سلول های AGS در محیط کشت RPMI-1640 حاوی درصد سرم جنین گاوی رشد داده شد. این سلول ها با دو پلاسمید pFLAG-CMV-3-tagD یا pFLAG-CMV-3 ترانسفکت شدند و سلول های دریافت کننده پلاسمید با افزودن 600 میلی گرم در لیتر G418، انتخاب گردیدند. سپس RNA کل سلول با استفاده از محلول RNX-Plus تخلیص شد و سنتز cDNA با کمک کیت انجام شد. سطح بیان mRNA ژن ID1 به روش q-RT PCR و با کاربرد پرایمرهای مناسب بررسی شد. در نهایت با استفاده از نرم افزار SPSSو آزمون های آماری t-test Indepent بیان هر یک از ژن ها مورد بررسی قرار گرفت.
یافته های پژوهش: با روش RT-PCR، بیان موفقیت آمیز ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری در سلول های AGS تایید شد. آنالیز بیان ژن نشان داد که بیان ژن ID1 به صورت معنی داری در سلول های AGS تیمار شده با tagD نسبت به سلـــول های کنترل، کاهـــش یافـــته است(P=0.0113).
بحث و نتیجه گیری: تحقیق حاضر نشان داد که بیان ژن ID1 در سلول های تحت تیمار با ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری، تغییر می یابد و به نظر می رسد، ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری در ایجاد این تغییر بیان نقش داشته باشد.
|
|
| واژه‌های کلیدی: باکتری هلیکوباکتر پیلوری|tagD|ID1 ، |
|
|
متن کامل [PDF 862 kb]
(28 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
ژنتیک
دریافت: 1398/10/18 | پذیرش: 1399/3/25 | انتشار: 1399/10/10
|
|
|
|
|
|
|
| ارسال پیام به نویسنده مسئول |
|
|
|
| ارسال نظر درباره این مقاله |
|
|
|
