fa بررسی توانای حفظ و نگهداری سلولهای بنیادی جنینی توسط سلولهای بنیادی مزانشیمی خون بند ناف بعنوان لایه تغذیه کننده میکروب شناسی پزشکی Medical microbiology پژوهشي Research مقدمه: از سلولهای فیبروبلاستی جنینی موش (MEFs) برای حمایت از رشد سلولهای بنیادی جنینی موشی (mESCs) و یا سلولهای بنیادی جنینی انسانی (hESCs) استفاده می شود. تکثیر پیوسته وپی درپی سلولهای mESCبطور معمول توسط هم کشتی این سلولها با MEFبدست می آید. سلولهای MEFبعنوان یک لایه پشتیبان برای سلولهای mESC عمل می کنند. احتمال انتقال رتروویروسها و دیگر پاتوژنها در اثر همجواری سلولهای MEF(که منشاء موشی دارند) با سلولهای ESوجود دارد. مواد و روشها: سلولهای سوماتیک نامحدود، مشتق شده ازخون بند ناف انسانussc) ) ازاهداکنندگان متعددی بدست آمد. از این سلولها بعنوان لایه پشتیبان جهت حمایت از رشد سلول C4 mESCمورد استفاده قرار گرفت. یافته های پژوهش: کلونی های سلولهای mESC که برروی hUSSCغیر فعال شده کشت یافته بودند در طی 30 روز کشت پی درپی بیش از 600 برابر تکثیر یافتند (درطی 10 پاساژ) در سلولهای mESC گسترش یافته برروی hUSSC، مشاهده گردید که مورفولوژی این سلولها و مارکرهای مولکولی ویژه سلولهای mESC تمایز نیافته، همگی همانند سلولهای mESCهستند که برروی MEF گسترش یافته است. این سلولها از نظر فاکتورهای رونویسی همچون OCT4،nanog و همچنین آنزیم تلومراز وLIFR , LIF , Brachyury , B2m , BMP4 , Rex1 مثبت بودند. بحث و نتیجه گیری: سلولهای mESCکشت داده شده برروی hUSSCدارای پتانسیل تمایزی جهت تمایز به هر 3 لایه زاینده سلولی (آندودرم، مزودرم، اکتودرم) می باشند ودارای کاریوتایپ دیپلوئید طبیعی نیز هستند. انجام مطالعات بیشتر برروی hUSSCشاید منجر به توسعه و بهبود روشهای کلینیکی برای گسترش سلولهای hESC در سلول درمانی نوین گردد. Embryonic stem cells (ES) are derived from the pluripotent inner cell mass (ICN) cells of blastocysts with the potential to maintain an undifferentiated stat indefinitely. The derivation process involves plating of the blastocysts on mouse embryonic fibroblast (MEF) and expansion of the outgrowth in to established ES cell line. ES cell capable of unlimited self-renewal by symmetric division and differented cells to all primitive embryonic germ layers. The capacity of ES cells to differentiate in to almost all the cell types of human body highlights their potentially to play a promising role in cell replacement therapies for treatment of human diseases. Materials & Methods: In this study, MEFs has been replaced with human mesenchymal stem cells (hMSCs). C4 mES cell (mouse embryonic stem cell line) colonies culture on inactivated hMSCs amplified ≥ 600-folds during the 30-days of continues culture. The longest continues expansion of C4 mES cells on hMSC was 30 passages. Finding: In this study the gene expression for Oct-4, Nanog, Rex1, Brachyury, LIF, LIFR, TERT, B2M, Stat3, Sox2, Fgf4 in mES cells, using reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and in which genes expression for Stat3, Sox2, Fgf4 genes was negative whilst the genes expansion for Oct-4, Nanog, Rex1, Brachyury, LIF, LIFR, TERT, B2M genes was positive. There was also a karyotype analysis for ES which showed normal result. The immunocytochemical analysis of Oct4 transcriptional factor for ES cells was made which showed positive result for this factor. Discussion & Conclusion: These genes may be novel candidates to play critical roles in the regulation of ESC pluripotency and self-renewal. سلولهای بنیادی جنینی, خون بند ناف, لایه تغذیه کننده, کاریوتایپ Embryonic stem cell, mesenchymal stem cell, blastocysts, feeder layer, pluripotency 234 242 http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-220-96&slc_lang=fa&sid=1 s haydari kashl سعید حیدری کشل saeed_heidari@spu.ir 960031947532846005406 960031947532846005406 Yes m rezaee tavirani مصطفی رضایی طاویرانی 960031947532846005407 960031947532846005407 No m ebrahimi مریم ابراهیمی 960031947532846005408 960031947532846005408 No m solaimani مسعود سلیمانی 960031947532846005409 960031947532846005409 No r roozafzoon رضا روز افزون 960031947532846005410 960031947532846005410 No s kaviani سعید کاویانی 960031947532846005411 960031947532846005411 No gh r behroozi غلامرضا بهروزی 960031947532846005412 960031947532846005412 No sh mohammad pour شهرام محمد پور 960031947532846005413 960031947532846005413 No a moayeri اردشیر معیری 960031947532846005414 960031947532846005414 No