Journal of Ilam University of Medical Sciences

fa بررسی اثر مهارکنندگی تکثیر سلولی و ضدسرطانی عصارۀ گیاه زیتون تلخ بر ردۀ سلولی TM4 در سرطان بیضه و فعالیت آنتی‌اکسیدانی آن Anti-oxidative and anti-cancer effects of Melia azedarach L. extract on Proliferation and Cell Viability of Testicular cancer TM4 cell line ژنتیک مولکولی genetic mlvkly پژوهشي Research <div style="text-align: justify;">مقدمه: سرطان بیضه شایع‌ترین سرطان در میان مردان در سرتاسر جهان است. امروزه کاربرد داروهای گیاهی به‌عنوان درمانی مکمل برای کاهش آثار این بیماری مورد‌توجه است. هدف از این تحقیق بررسی خاصیت ضد‌سرطانی، آنتی‌اکسیدانی و سمیت سنجی گیاه زیتون تلخ (Melia azedarch L.) بر ردۀ سلولی TM4 بود. مواد و روشها: پس از تهیۀ عصارۀ اتانولی گیاه زیتون تلخ ردۀ سلولی سرطان بیضه TM4 توسط غلظت‌های مختلف عصاره (10، 25، 50، 75، 100، 150، 250، 750 و 1000 میکروگرم در میلی‌لیتر( به مدت ۲۴، ۴۸ و ۷۲ ساعت تیمار شدند؛ سپس زنده‌مانی سلول‌ها توسط روشMTT، بیان نسبی ژن‌های CAS8 و CAS9 با استفاده از روش Real-time PCR و فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره‌ها با بررسی محتوای آنتوسیانین و میزان مهار رادیکال آزاد DPPH بررسی شد. در نهایت نتایج با آزمون آنالیز واریانس یک‌طرفه با نرم‌افزار SPSS vol.18 نسخه 18 تجزیه‌و‌تحلیل شد. یافته های پژوهش: نتایج مربوط به تست MTT نشان داد که عصارۀ زیتون تلخ در غلظت‌های مختلف بر سلول‌های سرطان بیضه آثار سمیت سلولی وابسته به دوز و زمان دارد، به‌طوری‌که بالاترین درصد مهار رشد معنی‌دار در غلظت‌های1000 میکروگرم در میلی‌لیتر مشاهده گردید (P≤0.01)؛ همچنین بیان ژن CAS8 در سلول‌های TM4 تیمار شده با عصارۀ گیاه در غلظت 2/174 (IC50) ‌‌‌ نسبت به نمونۀ کنترل افزایش ذاشت؛ اما بیان ژنCAS9  کاهش معنی‌داری نشان داد. علاوه بر این، محتوای آنتوسیانین و میزان مهار رادیکال آزاد DPPH با افزایش غلظت عصاره بیشتر شد. بحث و نتیجه‌گیری: براساس نتایج، عصارۀ گیاه زیتون تلخ به علت داشتن فعالیت آنتی‌اکسیدانی پتانسیل بالایی در از بین بردن سلول‌های سرطان بیضه دارد و با القای آپوپتوز و افزایش بیان ژن CAS8 می¬تواند به‌عنوان درمان مکمل در بهبود سرطان در نظر گرفته شود.  </div> <div style="text-align: justify;">Introduction:  Testicular cancer is one of the most common type of cancers to affect men. Medical herbs are increasingly considered useful complementary treatments for cancer. The aim of this study was to evaluate the cytotoxic, antioxidant, and anticancer capacity of Melia azedarach L. extract on testicular cancer TM4 cells. Materials & Methods: The TM4 cells were treated with various concentrations of leaf Melia azedarach L. extracts (10, 25, 50, 75, 100, 150, 250, 750, and 1000 µg ml⁻¹) for 24, 48, and 72 hours. MTT assay and real-time PCR were used for the evaluation of plant extract cytotoxicity and gene expression (CAS8, CAS9) analysis, respectively. Anthocyanin content and DPPH radical scavenging activity were evaluated for the antioxidant potential of plant extract. Statistical tests included one-way ANOVA, which was imported to SPSS V.18, and the significance level was considered less than 0.01. Results: MTT assay results revealed a decline in live cells with increasing concentration of plant extract in a dose- and time-dependent manner. Cell viability was significantly (P < 0.01) reduced, especially at a concentration of 1000 µg ml⁻¹. Also, the CAS8 gene expression was increased in TM4 cells treated with bitter olive extract at 174.2 µg ml⁻¹ concentration (IC50), whereas the CAS9 gene expression was decreased. Moreover, a higher DPPH activity and anthocyanin content were found with increasing plant extract concentration. Conclusion: Ethanolic extracts of Melia azedarach L. have antioxidant activity, which could significantly inhibit the proliferation of testicular cancer TM4 cells (A549) by inducing apoptosis and CAS8 gene expression. Therefore, it could be regarded as an additional treatment for testicular cancer.  </div> زیتون تلخ, سرطان بیضه, بیان ژن, MTT Melia azedarach L., Testicular cancer, Gene expression, MTT 38 49 http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-7850-1&slc_lang=fa&sid=1 Cobra Tofighi کبری توفیقی Tofighi86@gmail.com 9600319475328460048654 0009-0008-2311-3880 Yes Dept of Biology, Danesh Alborz University, Abeyek, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه دانش البرز، قزوین، ایران Negar Sadeghi نگار صادقی n.negarsadeghi@yahoo.com 9600319475328460048655 0009-0007-1161-3186 No Dept of Biology, Danesh Alborz University, Abeyek, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه دانش البرز، قزوین، ایران