fa ارزیابی کارایی ماتریس تمایلی حاصله از واریانت بهبودیافتۀ پپتید S3 در حذف اندوتوکسین از مادۀ دارویی فعال استرپتوکیناز و مقایسۀ عملکرد آن با ستون‌های تجاری بیوتکنولوژی biotechnolohgy پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:8pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:.1pt">مقدمه:</span></span></span></span></b> <span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">اندوتوکسین یا همان لیپوپلی‌ساکارید (</span></span>LPS<span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">) یکی از اجزای دیوارۀ باکتری‌های گرم منفی است که در صورت تماس با خون، باعث تحریک دستگاه ایمنی و باعث بروز تب و حتی عوارض نامطلوب جدی یا مرگ می‌شود. حذف اندوتوکسین از مهم‌ترین چالش‌های فرایند تخلیص در تولید داروهای زیستی نوترکیب است. اندوتوکسین باکتریایی (</span></span>LPS<span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">) در برابر گرما مقاوم است و از فیلترهای سترون‌کننده نیز عبور می‌کند و به علت عوارض خطرناک آن در موجود زنده، همواره بخشی از مراحل تخلیص پروتئین هدف به حذف این عامل مزاحم از محصول مربوط است.</span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span style="font-family:"B Zar""></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:8pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:.1pt">مواد و روش&shy;ها:</span></span></span></span></b> <span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">از ماتریس‌ تمایلی </span></span>S3E3-S-Sepharose<span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> که از تثبیت واریانت‌ بهبودیافتۀ پپتید ضدمیکروبی </span></span>S3<span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> موسوم به پپتید </span></span>S3E3<span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> بر روی رزین کروماتوگرافی سفاروز تولید شده است، برای حذف اندوتوکسین از مادۀ دارویی فعال استرپتوکیناز استفاده گردید و عملکرد این ماتریس با عملکرد ماتریس تجاری یک‌بارمصرف دارای لیگاند </span></span>S3<span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> و رزین تعویض یونی مقایسه شد.</span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span style="font-family:"B Zar""></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:8pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:.1pt">یافته &shy;های پژوهش: </span></span></span></span></b><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">نتایج بیان‌کنندۀ این بود که ماتریس </span></span>S3E3-S-Sepharose<span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> در مقایسه با ماتریس تمایلی تجاری بر پایۀ لیگاند </span></span>S3<span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> و کروماتوگرافی تعویض یونی، از بازده بازیابی پروتئین بیشتر (07/84 درصد در مقایسه با 50/81 درصد و 31/75 درصد) و بازیابی فعالیت بیولوژیک بیشتر (95/81 درصد در مقابل 27/76 درصد و 54/61 درصد) برخوردار بود.</span></span><b><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:.1pt"></span></span></span></span></b></span></span></span></span><br> <span style="font-size:8pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.1pt">بحث و نتیجه‌گیری</span></span></span></span></b><span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">: </span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">نتایج نشان می‌دهد که ماتریس </span></span>S3E3-S-Sepharose<span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> برای استفاده در فرایندهای تخلیص مادۀ دارویی فعال استرپتوکیناز و سایر داروهای زیستی نوترکیب، کاندیدای مناسبی به‌نظر می‌رسد.</span></span></span></span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:9pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">Introduction:</span></span></b> &nbsp;Endotoxin or lipopolysaccharide (LPS) is one of the components of the wall of gram-negative bacteria, which, when in contact with blood, stimulates the immune system and causes fever and even serious adverse effects or death. Removing endotoxin is one of the most daunting challenges presented to the purification process in the production of recombinant biological drugs. Bacterial endotoxin (LPS) is resistant to heat and passes through sterilizing filters, and due to its dangerous side effects in living organisms, part of the target protein purification process is always related to removing this disturbing factor from the product.</span></span><br> <span style="font-size:9pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">Materials & Methods: </span></span></b>The affinity matrix S3E3-S-Sepharose, which was produced by immobilizing the improved variant of antimicrobial peptide S3 called S3E3 peptide on Sepharose chromatography resin, was used to remove endotoxin from active pharmaceutical ingredient (API) of streptokinase, and the performance of this matrix was compared with the performance of a disposable commercial matrix (containing S3 peptide as its ligand) and with ion exchange chromatography resin.<span style="font-size:12.0pt"><span style="color:#374151"></span></span></span></span><br> <span style="font-size:9pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">Results:</span></span></b> The statistical analysis of the results revealed that compared to commercial S3 matrices and ion exchange chromatography, the S3E3-S-Sepharose matrix had higher protein recovery (84.07% compared to 81.50 and 75.31%, respectively) and higher streptokinase biological activity recovery (81.95% vs. 27 76.76 and 61.54%, respectively).</span></span><br> <span style="font-size:9pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">Conclusion:</span></span></b> As evidenced by the obtained results, the S3E3-S-Sepharose matrix seems to be a suitable candidate for use in the purification processes of Streptokinase API and other recombinant biopharmaceuticals.</span></span></div> پپتید ضدمیکروبی S3, حذف اندوتوکسین, واریانت بهبودیافتۀ S3, مادۀ دارویی فعال استرپتوکیناز Active pharmaceutical ingredient of Streptokinase, Anti-microbial S3, Endotoxin removal, Improved variants of S3 27 41 http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4984-3&slc_lang=fa&sid=1 Shahin Hadadian شاهین حدادیان hadadian@yahoo.com 9600319475328460048518 9600319475328460048518 Yes Dept of Nanobiotechnology, Group of New Technologies, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran گروه نانو بیوتکنولوژی، گروه تحقیقات فن‌آوری‌های نوین، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران Mina Sepahi مینا سپاهی msepahi@yahoo.com 9600319475328460048519 9600319475328460048519 No Dept of Nanobiotechnology, Group of New Technologies, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran گروه نانو بیوتکنولوژی، گروه تحقیقات فن‌آوری‌های نوین، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران Reza Ahangari cohan رضا آهنگری کهن cohan_r@yahoo.com 9600319475328460048520 9600319475328460048520 No Dept of Nanobiotechnology, Group of New Technologies, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran گروه نانو بیوتکنولوژی، گروه تحقیقات فن‌آوری‌های نوین، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران