Journal of Ilam University of Medical Sciences

fa بررسی بیان miRNAهای محیط کشت جنین‌های انسانی با کروموزوم‌های جنسی طبیعی و جنین‌های با یک کروموزوم جنسی X (سندرم ترنر) Evaluating the expression of miRNAs in the culture medium of human embryos with normal sex chromosomes and embryos with an X sex chromosome (Turner syndrome) زیست شناسی biology پژوهشي Research مقدمه: روش‌های کمک‌باروری و آزمایش ژنتیکی پیش از لانه‌گزینی (PGT) برای تشخیص آنوپلوئیدی، به‌منظور دستیابی به تولد نوزاد یوپلوئید و در زوجین نابارور یا کم بارور انجام می‌شود. miRNAها مولکول‌های RNA غیر رمزگذار تک‌رشته‌ای و مهم تنظیم‌کننده پس از رونویسی بیان ژن در فرایندهای مختلف بیولوژیکی و فیزیولوژیکی هستند. هدف این مطالعه بررسی برخی miRNAهای ترشح‌شده در محیط‌های کشت جنینهای انسان (به‌عنوان نشانگرهای زیستی تشخیصی) و ارتباط آن با میزان آنوپلوئیدی جنین و نتایج روش‌های کمک‌باروری است. مواد و روشها: چرخه‌های PGT حاصل از تزریق درون سیتوپلاسمی اسپرم (از فروردین سال 1401 تا خرداد سال 1401) با استفاده از مکمل‌سازی فلورسانس درجا Fluorescence in situ hybridization (FISH) ارزیابی شد. در ادامه، محیط‌ کشت سه جنین یوپلوئید و سه جنین آنیوپلوئید با یک کروموزوم جنسی X (ترنر) جمع‌آوری گردید و بیان miRNA hsa-miR-199a-5p, hsa-miR-199b-3p, hsa-miR-379-5p, hsa-miR-483-5p, hsa-miR-99a-5p, hsa-miR-432-5p با استفاده از RT-qPCR بررسی شد. یافته های پژوهش: در محیط ‌کشت جنین‌های یوپلوئید، افزایش معنی‌دار میزان بیان سه miRNA شامل hsa-miR-379-5p, hsa-miR-199a-5p, hsa-miR-199b-3p و کاهش بیان سه miRNA شامل hsa-miR-432-5p, hsa-miR-483-5p, hsa-miR-99a-5p با اختلاف معنی‌دار   P<0.001مشاهده گردید. بیان این miRNAها در محیط کشت جنین‌های ترنر با الگو کاملاً عکس بود. بحث و نتیجه‌گیری: در بررسی میزان بیان miRNAهای بررسی‌شده در این طرح، افزایش بیان سه miRNA و کاهش بیان سه miRNA دیگر در جنین‌های یوپلوئید با الگو، بیان عکس همین ‌miRNAها در جنین‌های ترنر را نشان داد. این نتایج می‌تواند نویدبخش باشد و برای استفاده از روش‌های غیرتهاجمی به جای بیوپسی جنین در بررسی‌های تشخیصی تعداد کروموزوم‌های جنسی مورد توجه قرار گیرد.   <h2 style="margin-top: 13px; text-align: justify;">Introduction: Assisted reproductive techniques and Preimplantation Genetic Test (PGT) are performed to detect aneuploidy to achieve a euploid baby's birth in infertile or low-fertility couples. miRNAs are single-stranded, non-coding RNA molecules and essential regulators of gene expression in various biological and physiological processes. The present study aimed to investigate some miRNAs damaged in the culture media of human embryos (as diagnostic biomarkers) and their relationship with the degree of aneuploidy of the embryo and assisted reproductive methods. Material & Methods: The PGT cycles derived sperm intracytoplasmic injection (April 2021 to June 2021) were evaluated using fluorescence in situ hybridization (FISH). Following that, the culture medium of three euploids and three aneuploid embryos with an X sex chromosome (Turner) was collected and the expression of has-miR-199a-5p, has-miR-199b-3p has-miR-379-5p, has-miR-483-5p, has-miR-99a-5p, and has-miR-432-5p were investigated using quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR). Findings: In the culture medium of euploid embryos, a significant increase was observed in the expression of three miRNAs, including hsa-miR-379-5p, hsa-miR-199a-5p, hsa-miR-199b-3p. Moreover, a decrease was detected in the expression of three miRNAs, including hsa-miR-432-5p, hsa -miR-483-5p, and hsa-miR-99a-5p, with a significant difference (P<0.0001). The expression of these miRNAs in the culture medium of Turner embryos with the model was the opposite. Discussion & Conclusion: In examining the expression level of miRNAs investigated in this project, the increase in the expression of three miRNAs and the decrease in the expression of three other miRNAs in euploid embryos demonstrated the opposite expression pattern of the same miRNAs in Turner embryos. These results can be considered promising for using non-invasive methods instead of fetal biopsy in the diagnostic studies of the number of sex chromosomes.</h2> <div style="text-align: justify;"> </div> تزریق داخل سیتوپلاسمی اسپرم, هیبریداسیون فلورسنت درجا (FISH), آزمایش ژنتیکی پیش از لانه‌گزینی, miRNA, محیط کشت بلاستوسیست Fluorescence in Situ Hybridization (FISH), Genetic Testing, miRNA, Intracytoplasmic Sperm Injection, Preimplantation Spent Blastocyst Medium 68 78 http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3622-5&slc_lang=fa&sid=1 Shahrzad Aghajani شهرزاد آقاجانی shahrzadaghajani1987@gmail.com 9600319475328460047804 9600319475328460047804 No Dept of Biology, Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran گروه زیست‌شناسی، واحد رشت، دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران Ali Salehzadeh علی صالح زاده salehzadeh@iaurasht.ac.ir 9600319475328460047805 9600319475328460047805 Yes Dept of Biology, Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran گروه زیست‌شناسی، واحد رشت، دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران Fatemeh Ghasemian فاطمه قاسمیان ghasemian@guilan.ac.ir 9600319475328460047806 9600319475328460047806 No Dept of Biology, Faculty of Sciences, University of Guilan, Rasht, Iran گروه زیست‌شناسی، دانشکدۀ علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت، ایران Marzieh Mehrafza مرضیه مهرافزا dr.Mehrafza@mehrinstitute.org 9600319475328460047807 9600319475328460047807 No Mehr Fertility Research Center, Guilan University of Medical Sciences, Rasht, Iran مرکز تحقیقات و درمان ناباروری مهر پویای گیل، دانشگاه گیلان، رشت، ایران