en بررسی و مقایسۀ میزان بیان ژن‌های ZBTB16(Plzf)، ZFP و آلکالین فسفاتاز در سه جمعیت سلولی: سلول‌های بنیادی جنینی، شبه‌جنینی (ES-like) و اسپرم‌ساز موش بیولوژی biology پژوهشي Research <span style="font-size:8pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:.1pt">مقدمه:</span></span></span></span></b> <span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">آلکالین فسفاتاز یکی از آنزیمهای اساسی طی فرایند اسپرماتوژنز است که جزو عامل‌های پرتوانی سلول‌های بنیادی است و در حفظ پرتوانی آن‌ها نقش دارد. پروتئینهای </span></span>ZBTB16<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> و </span></span>ZFP<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> نیز جزو عوامل بااهمیت سلول‌های بنیادی هستند که در سلول‌های بنیادی پرتوان بیان می‌شوند و با نقش خود در مسیرهای پیامرسانی باعث حفظ حالت پرتوانی آن‌ها می‌گردند.</span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:8pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:.1pt">مواد و روش&shy;ها:</span></span></span></span></b> <span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">اولین اقدام، جداسازی سلول‌های بنیادی اسپرم</span></span>‌<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">ساز و پس از آن، تهیۀ سلول‌های بنیادی جنینی موش و سلول‌های </span></span>ES-like<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> است. پس از آن، رنگ‌آمیزی آلکالین فسفاتاز انجام شد و در ادامه، بررسی شبکۀ پروتئین-پروتئین و ارتباط ژن</span></span>‌<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">ها صورت گرفت؛ سپس با استفاده از فن </span></span>Fluidigm PCR<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> بیان ژن‌های </span></span>ZBTB16<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> و </span></span>ZFP<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> سنجیده گشت و همچنین در انتها، رنگ‌آمیزی ایمونوهیستوشیمی پروتئین </span></span>ZBTB16<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> در لوله‌های اسپرم‌ساز نیز انجام شد.</span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:8pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.1pt">یافته‌های پژوهش:</span></span></span></span></b> <span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">جمعیتهای سلول‌های بنیادی بیان مثبت آلکالین فسفاتاز را نشان دادند و همچنین بیان بسیار اندک و منفی آن در سلول‌های سرتولی و فیبروبلاستها مشاهده گردید. بیان مثبت ژن‌های </span></span>ZBTB16<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> و </span></span>ZFP<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> نیز در این سه جمعیت نشان داده شد و بیان منفی آن‌ها در سلول‌های سرتولی نیز مشاهده گردید که نشان‌دهندۀ اختصاصی بودن این عوامل است. شبکۀ ارتباطی رسم‌شده نشان‌دهندۀ میزان و نوع تأثیر این ژن‌ها بر یکدیگر و دیگر ژن‌ها است.</span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:8pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.1pt">بحث و نتیجه‌گیری</span></span></span></span></b><span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">: می‌توان چنین نتیجه‌گیری کرد که آلکالین فسفاتاز و همچنین ژن‌های </span></span>ZBTB16<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> و </span></span>ZFP<span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> جزو نشانگرهای خاص سلول‌های بنیادی پرتوان و همچنین جزو عامل‌های اصلی سلول‌های بنیادی شبه‌جنینی هستند.</span></span></span></span></span></span><br> <br> <span style="font-size:13pt"><span style="line-height:150%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:Arial,sans-serif"><i><span dir="LTR" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:150%"><span style="font-family:"Times New Roman",serif"></span></span></span></i></span></span></span></span></span> <span style="font-size:9pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">Introduction:</span></span></b> One of the vital enzymes during spermatogenesis, which is one of the pluripotency factors of stem cells and contributes to maintaining their pluripotency is alkaline phosphatase. ZBTB16 and ZFP proteins are critical elements in stem cells which are expressed in pluripotent stem cells and maintain their pluripotency due to their role in messaging pathways.</span></span><br> <span style="font-size:9pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">Material & Methods:</span></span></b> The separation of the spermatogonial stem cells is the initial stage, followed by the preparation of the mouse embryonic stem cells and ES-like cells. The protein-protein network and the connections between genes were then investigated after alkaline phosphatase staining. Then, using the Fluidigm PCR method, the expression of the ZBTB16 and ZFP genes was determined. Finally, spermatogonia was immunohistochemically stained for the ZBTB16 protein.</span></span><br> <span style="font-size:9pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">(Ethic Code: IR.AUSMT.REC.1400.29)</span></span><br> <span style="font-size:9pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">Findings:</span></span></b> Alkaline phosphatase was expressed positively by stem cell types; moreover, it was absent in Sertoli and fibroblast cells. Additionally, the specificity of these factors was demonstrated by the positive expression of the ZBTB16 and ZFP genes in these three cells and their negative expression in Sertoli cells. The connection and effect of these genes on the other genes are shown by the Protein-Protein network analysis.</span></span><br> <span style="font-size:9pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">Discussion & </span></span></b><b><span style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">Conclusion:</span></span></b> Alkaline phosphatase, as well as ZBTB16 and ZFP genes are expected to be among the special markers of pluripotent stem cells and the critical elements of embryonic stem-like cells.</span></span> سلول‌های بنیادی اسپرم‌ساز (SSC), سلول‌های بنیادی جنینی, آلکالین فسفاتاز, پروتئین ZBTB16, پروتئین ZFP Alkaline phosphatase, Embryonic stem cells, Spermatogonial stem cells (SSCs), ZBTB16 protein, ZFP protein 29 41 http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-7170-1&slc_lang=en&sid=1 Emad Reza عماد رضا e.reza@ausmt.ac.ir 9600319475328460046324 9600319475328460046324 No Faculty of Biotechnology, Amol University of Special Modern Technologies, Amol, Iran گروه زیست‌فناوری، دانشکدۀ زیست‌فناوری، دانشگاه تخصصی فناوری‌های نوین آمل، آمل، ایران Hossein Azizi حسین عزیزی h.azizi@ausmt.ac.ir 9600319475328460046325 9600319475328460046325 Yes Faculty of Biotechnology, Amol University of Special Modern Technologies, Amol, Iran گروه زیست‌فناوری، دانشکدۀ زیست‌فناوری، دانشگاه تخصصی فناوری‌های نوین آمل، آمل، ایران Ali Asghar Ahmadi علی اصغر احمدی ahmadi.pasteur@gmail.com 9600319475328460046326 9600319475328460046326 No North Research Center, Pasteur Institute of Iran, Amol, Iran پژوهشکدۀ شمال، انستیتو پاستور ایران، آمل، ایران