Journal of Ilam University of Medical Sciences

fa مطالعۀ تأثیر کروسین زعفران بر آپوپتوز و یا زنده‌مانی رده سلول‌های سرطانی سینه MCF7 و بیان ژن‌های مسیر سیگنالینگ PTEN/AKT1 Study of Crocin (Saffron Component) on Apoptosis or Survival of MCF7 Breast Cancer Cells Lines) PTEN/AKT1 signaling pathway) ژنتیک Molecular Genetics پژوهشي Research مقدمه: نتایج تحقیقات طب جدید نشان داده است که می‌توان از متابولیت‌های ثانویـۀ زعفران در تولیـد داروهای مکمل مرتبط با درمان انواع سرطان‌های انسانی استفاده کرد. کلالۀ زعفران به شکل اختصاصی رشد و تکثیـر سلول‌های سـرطانی را مهـار می‌کند، درحالی‌که بر رشد سلول‌های طبیعی بی‌تأثیر است؛ همچنین مصرف این ماده به کاهش عوارض جانبی ناشی از شیمی‌درمانی منجر می‌شود؛ بنابراین، تحقیق حاضر به‌منظور مطالعۀ اثر کروسین زعفران بر رشد و آپوپتوز سلول‌های سرطانی سینه و نیز تعیین سازوکار مولکولی آن انجام گرفت. مواد و روش ها: ابتدا سلول‌های سرطانی سینه MCF7 از مجموعه سلولی انستیتو پاستور ایران تهیه گردید و سپس در داخل محیط کشت RPMI1640 با 10 درصد FBS، درون فلاسک کشت داده شدند. به‌منظور تعیین اثر سمیت کروسین بر سلول‌های سرطانی، تیمار در غلظت‌های گوناگون و در ساعت‌های مختلف صورت گرفت؛ سپس با استفاده از روش آزمایش MTT، تکثیر و یا مرگ سلول‌ها مطالعه گردید. آزمایش رنگ‌آمیزی DAPI برای نشان دادن آپوپتوز سلولی انجام شد و استخراج RNA از همۀ تیمارها صورت گرفت. پس از تهیۀ cDNA به‌منظور تعیین سازوکار تأثیر کروسین، بیان ژن‌های مرتبط با آپوپتوز PTEN و نیز ژن مسیر ضدآپوپتوزی Akt به روش Real-time PCR مطالعه گردید. یافته‌ها: نتایج به‌دست‌آمده از آزمایش MTT نشان داد که کروسین تکثیر سلول‌های MCF7 را مهار می‌کند و سبب القای آپوپتوز در این سلول‌ها می‌شود. نتایج DAPI تغییرات کیفی آپوپتوز سلول سرطانی را پس از تیمار کروسین نشان داد. علاوه بر این، نتایج Real-time PCR نشان داد که کروسین سبب افزایش بیان ژن PTEN (P=0.041) در سلول‌های سرطانی سینه MCF7 و نیز کاهش معنا‌دار ژن Akt1 (P=0.038) شد. بحث و نتیجه‌گیری: یافته‌ها نشان داد که کروسین مسیر آپوپتوز در سلول‌های سرطانی سینه MCF7 را تحریک می‌کند؛ بنابراین می‌توان در جهت راهبرد جدید درمانی برای تیمار سرطان سینه، از کروسین استفاده کرد. Introduction: Evidence shows that secondary metabolites of saffron can be used in the formulation of new drugs for the treatment of various human cancers. It is demonstrated that saffron crocin inhibits the proliferation of cancer cells while having no inhibition effect on the growth of normal cells. Consumption of this substance also reduces the side effects of cancer chemotherapy. Therefore, the present study was performed to investigate the effect of crocin on the proliferation and apoptosis of breast cancer cells and determine its molecular mechanism. Material & Methods: Initially, MCF7 breast cancer cells were prepared from the Pasteur Institute of Iran Cell Bank and cultured in RPMI1640 medium with  FBS 10%. To determine the effect of crocin toxicity on cancer cells, treatment was conducted at different concentrations and different hours, and (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5 diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay was performed. The cell proliferation or cell apoptosis was evaluated as well. DAPI staining was performed to demonstrate cell apoptosis. After RNA extraction and cDNA preparation, the expression of an apoptosis-related gene (PTEN) and Akt pathway genes were measured by Real-time polymerase chain reaction (PCR) to determine the mechanism of the crocin effect. Findings: Results of the MTT assay showed that crocin inhibited the proliferation of MCF7 cells and induced apoptosis in these cells. In addition, real-time PCR results showed that crocin increased PTEN gene expression (P=0.041) in MCF7 breast cancer cells and significantly decreased Akt1 gene expression (P=0.038). Discussion & Conclusion: The results indicate that crocin stimulates the apoptotic cells in MCF7 breast cancer cells and can be used as a new therapeutic strategy for the treatment of breast cancer.   آپوپتوز, سرطان سینه, کروسین, MCS7 Apoptosis, Breast cancer, Crocin, MCF7 47 55 http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4400-3&slc_lang=fa&sid=1 Saeid Ghorbian سعید قربیان ghorbian20@yahoo.com 9600319475328460045777 9600319475328460045777 Yes Dept of Molecular Genetics, Ahar Branch, Islamic Azad University, Ahar, Iran گروه ژنتیک مولکولی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد اهر، اهر، ایران Aysan Hajizadeh آیسان حاجی زاده hajizadeh6931@yahoo.com 9600319475328460045778 9600319475328460045778 No Dept of Molecular Genetics, Ahar Branch, Islamic Azad University, Ahar, Iran گروه ژنتیک مولکولی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد اهر، اهر، ایران