Journal of Ilam University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام
J. Ilam Uni. Med. Sci.
Medical Sciences
http://sjimu.medilam.ac.ir
96
journal96
1563-4728
2588-3135
doi
fa
jalali
1400
5
1
gregorian
2021
8
1
29
3
online
1
fulltext
fa
تأثیر ویتامین C بر مقاومت دارویی 5-FU در سلولهای سرطانی کولون HT29
Investigation of the Effects of Vitamin C on Resistance to 5-FU in Colon Cancer Cells Line HT29
ژنتیک
Molecular Genetics
پژوهشي
Research
<strong><em><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مقدمه:</span></span></em></strong> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">امروزه، تحقیقات گستردهای در استفاده از آنتیاکسیدانتها در کاهش آثار جانبی شیمی داروها و شکستن مقاومت سرطان نسبت به شیمی دارو در حال انجام است. هدف این مطالعه نیز، استفاده از ویتامین </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">C</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> بهعنوان آنتیاکسیدانت و تعیین تأثیر آن در مقاومت دارویی سلولهای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">HT29</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> است.</span></span><br>
<strong><em><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روشها:</span></span></em></strong> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">در طول این مطالعۀ مورد_شاهدی، ابتدا سلولهای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">HT29</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> کشت داده شدند و با استفاده از روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT assay</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">، تکثیر سلولی و یا مرگ سلولها در تیمار با ویتامین </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">C</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و داروی</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">5-FU</span></span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> بررسی گردید؛ همچنین آزمون </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">DAPI</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> برای نشان دادن آپوپتوز سلولی صورت گرفت. پس از استخراج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">RNA</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و تهیۀ </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">cDNA</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">، برای تعیین سازوکار مولکولی آپوپتوز توسط دارو و اثر مهارکنندگی و یا تشدید ویتامین </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">C</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> بر سیگنالینگ سلولی آپوپتوز، بیان ژنهای مرتبط با رشد و آپوپتوز مارکرهای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">casp3, Bax</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> به روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Real-time PCR</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> سنجیده شد.</span></span><br>
<em><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> <strong>یافتههای</strong></span></span></em> <strong><em><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">پژوهش:</span></span></em></strong><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> نتایج بهدستآمده از آزمایش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> نشان داد که ویتامین </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">C</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> هیچ تأثیر معناداری (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">P<0.05</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">) در کاهش اثر </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">5-FU</span></span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> در آپوپتوز سلولها ندارد. نتایج دپی و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">DNA ladder assay</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> بهدستآمده از تیمار سلولهای </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">HT29</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> تغییرات کیفی آپوپتوز سلولی را نشان داد. علاوه بر این، نتایج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Real-time PCR</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> نشان داد افزایش معناداری در بیان ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Bax</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> Casp3</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> بر سلولهای سرطانی کولون </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">HT29</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> در تیمار با شیمی دارو وجود دارد.</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span><br>
<strong><em><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">بحث</span></span></em></strong> <strong><em><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">و</span></span></em></strong> <strong><em><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجهگیری</span></span></em></strong><strong><em><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">:</span></span></em></strong> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">یافتهها</span></span> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">نشان داد ویتامین </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">C</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> مانع تأثیر شیمی دارو نشد، اگرچه هیچ تأثیر مثبتی هم بر روی رشد سلولهای سرطانی نداشت؛ بنابراین، مصرف ویتامین </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">C</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> از سوی بیمارانی که در حال شیمیدرمانی هستند، هیچ ممانعتی بر تأثیر دارو نخواهد داشت و میتواند بیمار را از آثار جانبی دارو محافظت کند.</span></span>
<em>Introduction</em>: There is growing evidence about the use of antioxidants to reduce the side effects of chemotherapy and cancer drug resistance. Therefore, this study aimed to use vitamin C as an antioxidant and determine its effect on drug resistance in HT29 cells.<em><span dir="RTL"></span></em><br>
<br>
<em>Materials & Methods</em>: During this case-control study, HT29 cells were first cultured and evaluated by MTT assay for cell death in the presence of vitamin C and 5FU. DAPI staining was also performed to visualize cell apoptosis. After RNA extraction and cDNA preparation, to determine the molecular mechanism of apoptosis by the drug and the inhibition effect or aggravation of vitamin C on cellular signaling of apoptosis, expression of growth-related genes and apoptosis of Caspase-3 and Bax were measured by real-time PCR.<em><span dir="RTL"></span></em><br>
<br>
<em>Findings</em>: The results of the MTT test showed that vitamin C had no significant effect on cell apoptosis induced by 5-FU. DAPI and DNA ladder assay results from HT29 cells showed qualitative changes in cell apoptosis. In addition, real-time PCR results revealed increased expression of Bax and Caspase-3 in HT29 colon cancer cells treated with chemotherapy.<em><span dir="RTL"></span></em><br>
<br>
<em>Discussions & Conclusions</em>: Our findings showed that vitamin C did not prevent the effect of chemo drug although it had no positive effect on the growth of cancer cells. Therefore, vitamin C intake by patients undergoing chemotherapy will not affect the drug's effect on the tumor and may protect the patient from side effects.<em><span dir="RTL"></span></em><br>
سرطان کلورکتال, ویتامین C, آپوپتوز, شیمی دارو 5-FU, HT29
Apoptosis, Colorectal cancer, HT29, Vitamin C, 5fu chemistry
49
58
http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4400-2&slc_lang=fa&sid=1
Arezo
Zarei
ارزو
زارعی
zareiarezoo74@gmail.com
9600319475328460044824
9600319475328460044824
No
Dept of Molecular Genetics, Ahar Branch, Islamic Azad University, Ahar, Iran
گروه ژنتیک مولکولی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد اهر، اهر، ایران
Saeid
Ghorbian
سعید
قربیان
ghorbian20@yahoo.com
9600319475328460044825
9600319475328460044825
Yes
Dept of Molecular Genetics, Ahar Branch, Islamic Azad University, Ahar, Iran
گروه ژنتیک مولکولی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد اهر، اهر، ایران