fa بررسی اثر اوژنول بر بیان ژن ‌های CASP8 و CASP9 در سلول ‌های رده سرطان کولون HT-29 بیوشیمی biochemistry پژوهشي Research <strong><em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مقدمه:</span></span></em></strong> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">در سال&shy; های اخیر بسیاری از مطالعات علمی و پزشکی نشان می &shy;دهند که اوژنول با فعالیت ضد التهابی، آنتی&shy; اکسیدانی، تاثیرگذاری بر چرخه&shy; سلولی و القاء آپوپتوز می &shy;تواند در پیشگیری و کاهش سرعت پیشرفت سرطان مفید واقع شود. در همین راستا پژوهش حاضر نیز اثر اوژنول بر قابلیت زیست پذیری و میزان بیان ژن&shy; های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">CASP8</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">CASP9</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> در سلول&shy; های رده سرطان کولون انسان(</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">HT-29</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">) را مورد بررسی قرار داده است.</span></span><br> <strong><em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش &shy;ها:</span></span></em></strong> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">در پژوهش حاضر سلول&shy; های رده سرطان کولون انسان(</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">HT-29</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">) در محیط کشت </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">RPMI-1640</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> غنی شده با 10 درصد سرم جنین گاوی کشت داده شدند. با تیمار سلول &shy;ها در غلظت &shy;های 250، 500، 750، 900 و 1000 میکرومولار اوژنول و انکوبه شدن در زمان &shy;های 24، 48 و 72 ساعت، میزان قابلیت زیست پذیری سلول &shy;ها با استفاده از آزمون </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> بررسی شد. بیان ژن&shy; های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">CASP8</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">CASP9</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> نیز به وسیله&shy; تجزیه و تحلیل </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Real-time PCR</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> در سلول &shy;های تیمار شده در غلظت 750 میکرومولار و در سه زمان مورد بررسی قرار گرفت.</span></span><br> <strong><em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته&shy; های پژوهش: </span></span></em></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">همگام با افزایش غلظت و مدت زمان تیمار، هر دو رده سلولی با کاهش درصد سلول&shy; های زنده مواجه شدند که البته این کاهش در سلول&shy; هـــای سرطانی بسیار بیشتر از سلول&shy; های فیبروبلاستی مشاهده شد. هم چنین در رده تیمار شده با غلظت 750 میکرومولار، بیــــان ژن&shy; های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">CASP8</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">CASP9</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> به صورت معنی &shy;داری نسبت به گروه&shy; های کنترل افزایش یافت.</span></span><br> <strong><em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">بحث و نتیجه گیری: </span></span></em></strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">اوژنول احتمالاً دارای اثر مهاری بر رشد، تکثیر و تهاجم سلول &shy;&shy;های رده سرطان کولون از طریق افزایش بیان ژن&shy; های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">CASP8</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">CASP9</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> دارد و آپوپتوز را در سلول &shy;های دودمان سرطانی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">HT-29</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> القاء کرده و موجب کاهش خطر سرطانی شدن سلول &shy;های عادی شود.</span></span> <em>Introduction:</em> Many scientific and medical studies in the recent years have shown that Eugenol could be an effective reagent in preventing and reducing cancer progression by antioxidant and anti-inflammatory activities and induction of apoptosis in cancer cells. In this regard the present study also examined the effect of Eugeonl on the viability and expression of CASP8 and CASP9 genes in human colorectal cancer cell line (HT-29).<br> &nbsp;<br> <em>Materials & Methods:</em> In the present study, human colorectal cancer cell line (HT-29) was cultured in RPMI-1640 medium enriched with 10% bovine serum. The cells were treated in different concentration (250, 500, 750, 900, 1000 &mu;M) of Eugenol and incubated for 24, 48 and 72 hours. After that cell viability was analyzed by MTT assay. The expression of CASP8 and CASP9 genes was also evaluated by Real-time PCR analysis in treated cells at 750 &mu;M concentration of Eugeonl and during 24, 48 and 72 hours, incubation.<br> &nbsp;<br> <em>Findings:</em> Along with increasing concentration and duration of Eugenol treatment, both cell lines encountered a decrease in the percentage of live cells. Although this reduction was found to be much higher in the cancer cells than in fibroblastic cells. Also, in the treated group with a concentration of 750 &mu;m, expression of CASP8 and CASP9 genes significantly increased compared to control groups.<br> &nbsp;<br> <em>Discussion & Conclusions: </em>Eugenol may have an inhibitory effect on the growth, proliferation and invasion of colon cancer cells by increasing the expression of CASP8 and CASP9 genes, and inducing apoptosis in HT-29 cancer cells and reducing the risk of cancerous cell proliferation it turns out. اوژنول, آپوپتوز, HT-29, CASP8, CASP9 Eugenol, Apoptosis, HT-29, CASP8, CASP9 85 96 http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4965-4&slc_lang=fa&sid=1 Milad Banitalebi Dehkordi میلاد بنی طالبی دهکردی milad_banitalebi@yahoo.com 9600319475328460040785 9600319475328460040785 No Dept of Basic Science, Faculty of Biology, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد،، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران noosha zia jahromi نوشا ضیاء جهرمی nooshazia.59@gmail.com 9600319475328460040786 9600319475328460040786 Yes Dept of Basic Science, Faculty of Biology, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد،، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران Hosein Sazgar حسین سازگار hoseinsazgar@yahoo.com 9600319475328460040787 9600319475328460040787 No Dept of Basic Science, Faculty of Biology, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد،، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران