fa مطالعه تاثیر استوباکتر جداسازی شده از ترشیجات محلی در مسیر سیگنالینگ سلولی PTEN/AKT در سلول های سرطانی کولون HT29 میکروبشناسی Microbiology پژوهشي Research <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مقدمه:</span></span></strong> <span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">برهم خوردن بالانس اکوسیستم میکروبی، باعث تغییرات بیولوژیکی در ارتباط با سرطان کولورکتال و تکثیر سلولی و مرگ برنامه ریزی شده آن ها و نیز پاسخ های ایمنی می گردد. هدف از این مطالعه تعیین تاثیر باکتری های پروبیوتیک بر بیان ژن های مرتبط با رشد، متاستاز و آپوپتوزدر سلول های سرطانی کولون </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">HT29</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> می باشد.</span></span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش ها:</span></span></strong> <span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">در طول این مطالعه ابتدا باکتری های پروبیوتیک استوباکتر کشت داده شدند و پس از تهیه کاندیشن مدیا بر روی سلول های سرطان </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">HT29</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> تیمار شدند. با استفاده از روش </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT assay</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> مورد بررسی قرار گرفت. استخراج </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">DNA</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> از سلول های تیمار شده انجام شد و تست </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">DNA Ladder assay</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> صورت گرفت. پس از استخراج </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">RNA</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و تهیه </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">cDNA</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">، بیان ژن های مرتبط با رشد(</span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">AKT1</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">PTEN</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">) و نیز ژن مسیر آپوپتوز(</span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">BAX</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">) به روش </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">Real-time PCR</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> مورد سنجش قرار گرفت.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; </span></span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته های پژوهش:</span></span></strong> <span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج حاصل از آزمایش</span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> نشان داد که باکتری های استوباکتر تکثیر سلول های </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">HT-29</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> را مهار نموده و سبب القاء آپوپتوز در این سلول ها می شوند. نتایج </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;DNA ladder assay</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">حاصل از تیمار سلول های </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">HT29</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> با باکتری های ذکر شده تغییرات کیفی آپوپتوز سلولی را نشان داد. علاوه بر این نتایج </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">Real-time PCR</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> نشان داد که باکتری های استوباکتر سبب افزایش بیان ژن های(</span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">BAX</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">PTEN</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">) در سلول های سرطانی کولون </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">HT29</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> شد.</span></span></span><br> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">بحث و نتیجه</span></span></strong> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">گیری:</span></span></strong> <span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">استوباکتر مسیر سیگنالینگ سلولی آپوپتوز در سلول های سرطانی کولون </span></span></span><span dir="LTR" style="font-style:normal;"><span style="font-size:10.0pt;">HT29</span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> را تحریک نموده و می توان در جهت استراتژی جدید درمانی و یا اجوانت تراپی برای تیمار سرطان کولون استفاده نمود.</span></span></span><span style="font-style:normal;"><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:13.0pt;"></span></span></span><br> &nbsp; Introduction: The imbalance of the microbial ecosystem causes biological changes associated with colorectal cancer and cell proliferation and their planned death, as well as the immune responses. The aim of this study was to determine the effect of probiotic bacteria on the expression of genes associated with growth, metastasis and apoptosis in cancer cells of the HT29 colon.<br> &nbsp;<br> Materials & Methods: During this study, probiotic Acetobacter were cultured and treated with HT29 cancer cells after preparation of media. The MTTassay method was investigated. DNA extraction from the treated cells was performed and the DNA Ladder assay test was performed. After extraction of RNA and preparation of cDNA, the expression of genes related to growth (AKT1 and PTEN) and apoptosis pathway gene (BAX) was measured by Real-timePCR.<br> &nbsp; <pre> <em>Findings:</em> The results of the MTT assay showed that the Acetobacter bacteria inhibited the proliferation of HT-29 cells and induced apoptosis in these cells. The DNA ladder assay results from treatment of HT29 cells with these bacteria showed qualitative changes in cell apoptosis. In addition, the results of Real-time PCR indicated that the bacterial strains increased the expression of BAX (PTEN) genes in the cancer cells of the HT29 colon.</pre> <pre> </pre> <pre> <em>Discussion & Conclusions:</em> Acetobacter stimulates cellular apoptosis signaling pathway in cancer cells of the HT29 colon and it can be used as an adjuvant therapy in colon cancer treatment or in new treatment strategies.</pre> <pre> </pre> سرطان کلورکتال, باکتری استوباکتر, HT29 Colorectal cancer, Acetobacter, HT29 183 193 http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4906-1&slc_lang=fa&sid=1 Pariya Azarng پریا آذرنگ pari.azari20@gmail.com 9600319475328460040018 9600319475328460040018 No Dept of Biology, Bonab Branch, Islamic Azad University, Bonab,Iran گروه زیست شناسی، واحد بناب، دانشگاه آزاد اسلامی، بناب، ایران Changiz Ahmadizadh چنگیز احمدی زاده dr_ahmadizadeh@yahoo.com 9600319475328460040017 9600319475328460040017 Yes Dept of Microbiology, Ahar Branch , Islamic Azad University, Ahar,Iran گروه میکروبیولوژی، واحد اهر، دانشگاه آزاد اسلامی، اهر، ایران