Journal of Ilam University of Medical Sciences

fa بررسی فعالیت پروتئازی لاکتوکوکوس لاکتیس بر کاهش حساسیت زایی پروتئین های کازئین شیر گاو Investigation of Proteolytic Ctivity of Lactococcus lactis in Reducing Cow´s Milk Caseins Allergenicity پژوهشي Research مقدمه: شیر گاو عامل اولین و رایج ترین حساسیت غذایی در اوایل دوران کودکی با شیوع 5/7-2 درصد می باشد. لخته رنینی شیر شامل چهار پروتئین اصلی αs1، αs2، β و k کازئین ها می باشد. محتوای کازئینی شیر گاو، نقش اساسی را در بروز حساسیت به شیر در کودکان ایفا می کند. سیستم پروتئولیتیک باکتری های اسید لاکتیک قادر به هیدرولیز اپی توپ های آلرژی زای پروتئین های شیر و در نتیجه آن کاهش حساسیت زایی کازئین ها می باشد. هدف از این پژوهش انتخاب بهترین سویه باکتری های اسید لاکتیک از نمونه های شیر گاو به منظور کاهش حساسیت زایی کازئین شیر گاو می باشد.  مواد و روش ها: در مطالعه حاضر پس از جداسازی 30 نوع کلنی باکتری های اسید لاکتیک کوکسی شکل از 20 نمونه شیر گاو بومی ایران، فعالیت پروتئولیتیکی آن ها بر روی هیدرولیز پروتئین های کازئین شیر گاو با استفاده از روش های SDS-PAGE و RP-HPLC بررسی شد. سپس از میان 15 سویه جدا شده با فعالیت پروتئازی مناسب، توانایی اتصال αs1–کازئین طبیعی(به عنوان مهم ترین کازئین آلرژی زا) و هیدرولیز شده توسط باکتری با بهترین فعالیت پروتئولیتیکی به IgE سرم کودکان دارای حساسیت به شیر گاو، به وسیله آزمون الایزای رقابتی مورد بررسی قرار گرفت.  یافته های پژوهش: پس از انجام تست های بیوشیمیایی شامل رنگ آمیزی گرم و تست کاتالاز، آزمون های مولکولی تشخیص گونه ای توسط تکثیر قطعه ژنی  16s rRNAصورت پذیرفت .نتایج به دست آمده نشان داد که باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس، توانایی هیدرولیز پروتئین های کازئین در شیر بدون چربی و سدیم کازئینات را داشته و باعث کاهش حساسیتزایی αs1–کازئین به میزان 27 برابر نسبت به پروتئین طبیعی می شود. بحث و نتیجه گیری: سویه لاکتوکوکوس لاکتیس جدا شده از نمونه های شیر گاو می تواند به عنوان کشت آغازگر اصلی یا الحاقی در محصولات لبنی برای کاهش واکنش پذیری ایمنی پروتئین های کازئین شیر گاو استفاده شود.    <div> <hr align="left" size="1" width="33%" ></div>  Introduction: Bovine milk is the first and most common cause of food allergy in early childhood with a prevalence rate of about 2-7/5%. The milk coagulum consists of four proteins αS1, αS2, β and к-caseins. Cow's milk caseins play a basic role in persistence of cow’s milk allergy (CMA) in children. Proteolytic system of lactic acid bacteria (LAB) has the ability to hydrolyze antigenic epitopes of milk proteins and, as a result, can reduce allergy to caseins.The aim of this study was to isolate the best lactic acid bacteria strain from cow’s milk samples in order to reduce bovine milk caseins allergenicity.    Materials & Methods: In the present study, after isolation of 30 cocci LAB from 20 Iranian cow’s milk samples, the effect of proteolytic activity of these bacteria on milk caseins was investigated by SDS-PAGE and RP-HPLC techniques. Subsequently, among the 15 strains with protease activity, the binding ability of native and hydrolyzed αS1-casein to IgE sera from cow’s milk allergic patients was determined by competitive ELISA test.   Findings: After accomplishing biochemical tests including gram staining and catalase test, molecular identification of the strains was done by 16s rRNA fragment sequencing. The obtained results suggested that Lactococcus lactis was able to hydrolyze casein fractions in both skim milk and sodium caseinate and could reduce allergenicity of bovine milk αS1-casein.   Discussion & Conclusions: Our conclusion demonstrated that the isolated Lactococcus lactis strain from cow’s milk samples can be used as a main or adjunct starter culture in dairy products to reduce immunor-eactivity of cow’s milk caseins.   حساسیت غذایی, کازئین, باکتری های اسید لاکتیک, الایزای رقابتی food hypersensitivity, casein, lactic acid bacteria, competitive ELISA 198 209 http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3688-1&slc_lang=fa&sid=1 Reihaneh Kordesedehi ریحانه کردسدهی kordesedehi.71@gmail.com 9600319475328460039115 9600319475328460039115 No Dept of Biotechnology, Faculty of Advanced Sciences and Technologies, Isfahan University , Isfahan, Iran گروه بیوتکنولوژی، دانشکده علوم و فناوری های نوین، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران Asghar Taherikafrani اصغر طاهری کفرانی a.taheri@ast.ui.ac.ir 9600319475328460039116 9600319475328460039116 Yes Dept of Biotechnology, Faculty of Advanced Sciences and Technologies, Isfahan University , Isfahan, Iran گروه بیوتکنولوژی، دانشکده علوم و فناوری های نوین، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران Mohammad Rabbanikhorasgani محمد ربانی خوراسگانی rabbani@ut.ac.ir 9600319475328460039117 9600319475328460039117 No Dept of Biology, Faculty of Science, Isfahan University , Isfahan, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران