Journal of Ilam University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام
J. Ilam Uni. Med. Sci.
Medical Sciences
http://sjimu.medilam.ac.ir
96
journal96
1563-4728
2588-3135
doi
fa
jalali
1392
11
1
gregorian
2014
2
1
21
7
online
1
fulltext
fa
بررسی و مقایسه میزان ایمنی زایی پروتئین های نوترکیب زیر واحدهای اتصالی نوروتوکسین تتانی و توکسین حساس به حرارت اشریشیاکلی و ارتباط آن با خاطره ایمنی
Evaluating and Comparing Immunization Level of the Recombinant Proteins, Binding Domain of Tetanus Neurotoxin and B Subnnit of Heat Labile Toxin of Escherichia coli, and their Relation to Immunological Memory
میکروب شناسی پزشکی
Medical microbiology
پژوهشي
Research
مقدمه: توکسین حساس به حرارت(LT) از عوامل حدت زای باکتری اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک است. زیر واحد LTB، قسمت اتصال دهنده توکسین و قادر به ایجاد مصونیتی شش ماهه در انسان است. توکسین کلستریدیوم تتانی عامل بیماری کشنده کزاز است و توکسوئید آن مصونیتی ده ساله در انسان ایجاد می نماید. زیر واحد Hc قسمت اتصال دهنده و ایمونوژنیک توکسین کزاز می باشد. میزان ایمنی زایی که هر یک از زیر واحدهای نوترکیب THc و LTB ایجاد می کنند، می تواند از عواملی باشد که در به وجود آمدن مصونیتی با ماندگاری متفاوت تاثیرگذار باشد. هدف از این مطالعه ارزیابی و مقایسه میزان ایمنی زایی دو پروتئین نوترکیب LTB و THc در مدل حیوانی و بررسی ارتباط آن با مدت مصونیت می باشد.
مواد و روش ها: بیان پروتئین های نوترکیب THc و LTB با استفاده از میزبانE.coli Bl21 DE3 تراریخته با وکتورهای pET28a حاوی این دو ژن در شرایط بهینه انجام شد. پس از بیان در شرایط بهینه، LTB از فاز نامحلول و THc از فاز محلول تخلیص و خلوص آن بر روی ژل SDS-PAGE بررسی گردید. جهت بررسی ایمنی زایی، این دو پروتئین به موش تزریق گردید. تیتر آنتی بادی حاصل با الایزا ارزیابی شده و مورد مقایسه قرار گرفت.
یافته های پژوهش: نتایج ژل SDS-PAGE، بیان زیاد هر دو پروتئین را نشان می داد. نتایج بررسی ایمنی زایی با این دو پروتئین نوترکیب نشان داد که در شرایط یکسان ایمنی زایی، زیر واحد THc تیتر آنتی بادی بالاتری نسبت به زیر واحد LTB دارد.
بحث و نتیجه گیری: تیتر آنتی بادی بالا، گام اول در ایجاد خاطره ایمنی قوی و ماندگار است. بنا بر این تفاوت در تیتر آنتی بادی ممکن است با طول عمر سلول های خاطره ای موش های ایمن شده با هر یک از این دو پروتئین نوترکیب ارتباط داشته باشد.
Introduction: Heat labile toxin (LT) is one of the virulence factors of Enterotoxigenic Escherichia coli. B subunit of LT (LHB) is the binding subunit and can induce six months immunity in humans. Tetanus toxin of Clostridium Tetani causes the fatal disease, tetanus. This toxoid induces two years immunity in humans. Hc subunit, as binding domain of the toxoid is considered as immunogenic part of tetanus toxin. The THc and LTB recombinant subunits have the potential role to induce immunological memories with different longevity. The purpose of this study was to evaluate and compare the immunogenicity of THc and LTB recombinant proteins in animal model and also to evaluate their roles in immunity duration.
Materials & methods: The recombinant proteins, THc and LTB, were expressed in the transgenic host, E.Coli Bl21 DE3 using pET28a vector containing their respected genes in optimum condition. After express-ion, LTB and THc were purified from insoluble and soluble phases, respectively. Then, their purity was confirmed by SDS-PAGE gel. To evaluate their immuno-genicity, these proteins were injected into mice and the antibody titer were evaluated and compared by ELISA technique.
Findings: SDS-PAGE results showed overexpressed levels of the proteins under study.Immunity assessment revealed that in the same condition of immunity the THc subunit produces a higher antibody titer in comparison with the LTB subunit.
ِDiscussion & Conclusion: The first step in creating a strong and long-lasting immune-ological memory is the induction of high titer of antibody. Thus, the difference in antibody titer may be related to memory cells lifetime in the immunized mice.
دومین اتصال دهنده توکسین کزاز(THc)، زیر واحد B توکسین حساس به حرارت(LTB)، پروتئین نوترکیب، تیتر آنتی بادی، خاطره ایمنی
Recombinant protein, binding domain of tetanus toxin (THc), B subnnit of heat labile toxin (LTB), antibody titer, im-mune memory
266
273
http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-220-204&slc_lang=fa&sid=1
e
rezaee
احسان
رضایی
9600319475328460011822
9600319475328460011822
Yes
m
saadati
مجتبی
سعادتی
9600319475328460011823
9600319475328460011823
No
j
salimian
جعفر
سلیمیان
jafarsalimyan@yahoo.com
9600319475328460011824
9600319475328460011824
No
gh
ovlad
غلامرضا
اولاد
9600319475328460011825
9600319475328460011825
No
a
miri
علی
میری
9600319475328460011826
9600319475328460011826
No
f
azizi jalilian
فرید
عزیزی جلیلیان
9600319475328460011827
9600319475328460011827
No
sh
nazarian
شهرام
نظریان
9600319475328460011828
9600319475328460011828
No