مرضیه رستم زاده رنانی، عباس دوستی،
دوره ۲۸، شماره ۵ - ( ۹-۱۳۹۹ )
چکیده
مقدمه: پروتئین ID، باعث افزایش تکثیر سلولی می شود و از طرفی تمایز را مهار کرده که ارتباط آن با روند تومورزایی روده را مشخص می کند. عفونت هلیکوباکتر با بیان ژن های مختلف ID در ارتباط است و بنا بر این هدف از این تحقیق بررسی بیان ژن ID۱ در سلول های AGS ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب pFLAG-CMV-۳-tagD است.
مواد و روش ها: در پژوهــش حاضر سلول های AGS در محیط کشت RPMI-۱۶۴۰ حاوی درصد سرم جنین گاوی رشد داده شد. این سلول ها با دو پلاسمید pFLAG-CMV-۳-tagD یا pFLAG-CMV-۳ ترانسفکت شدند و سلول های دریافت کننده پلاسمید با افزودن ۶۰۰ میلی گرم در لیتر G۴۱۸، انتخاب گردیدند. سپس RNA کل سلول با استفاده از محلول RNX-Plus تخلیص شد و سنتز cDNA با کمک کیت انجام شد. سطح بیان mRNA ژن ID۱ به روش q-RT PCR و با کاربرد پرایمرهای مناسب بررسی شد. در نهایت با استفاده از نرم افزار SPSSو آزمون های آماری t-test Indepent بیان هر یک از ژن ها مورد بررسی قرار گرفت.
یافته های پژوهش: با روش RT-PCR، بیان موفقیت آمیز ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری در سلول های AGS تایید شد. آنالیز بیان ژن نشان داد که بیان ژن ID۱ به صورت معنی داری در سلول های AGS تیمار شده با tagD نسبت به سلـــول های کنترل، کاهـــش یافـــته است(P=۰,۰۱۱۳).
بحث و نتیجه گیری: تحقیق حاضر نشان داد که بیان ژن ID۱ در سلول های تحت تیمار با ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری، تغییر می یابد و به نظر می رسد، ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری در ایجاد این تغییر بیان نقش داشته باشد.
