[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: درباره نشريه :: صفحه اصلي :: آخرين شماره :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 21، شماره 5 - ( مهر ماه 1392 ) ::
جلد 21 شماره 5 صفحات 171-160 برگشت به فهرست نسخه ها
طراحی و مطالعه بیوانفورماتیکی ژن صناعی موتانت زیرواحد کاتالیتیک دیفتریاتوکسین (dtxA)
غلامرضا اولاد*
دانشکده و پژوهشکده علوم پایه ، دانشگاه جامع امام حسین (ع)، تهران، ایران ، grolad@gmail.com
چکیده:   (8937 مشاهده)

مقدمه: دیفتری ناشی از باسیل کورینه باکتریوم، بیماری مهلکی است که بقراط در 5 قرن قبل از میلاد آنرا شرح داده است.عامل این بیماری کشنده، اگزوتوکسین DTx می‌باشد. دیفتریاتوکسین شامل دو زنجیره کاتالیتیک(A) و اتصال دهنده(B) می‌باشد. این توکسین با واسطه زنجیره Bبه رسپتور بسیاری از سلولهای اندام های بدن از جمله میوکارد ، اعصاب محیطی وکلیه ها متصل شده و زنجیره A پس از ورود به سلول، باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلول هدف می شود. تاکنون از توکسوئید این باکتری به عنوان واکسن استفاده شده است. هدف از این مطالعه طراحی و تهیه ژن جهش یافته صناعی زیرواحد کاتالیتیک دیفتریاتوکسین(dtxA) و بررسی های بیوانفورماتیکی لازم به منظور بررسی بیان در وکتور pET28a و تولید پروتئین نوترکیب حاصل از آن، به عنوان کاندید واکسن علیه دیفتری می‌باشد. مواد و روش ها: پس از تعیین و بهینه‌سازی ترادف ژن dtxA واجد دو جهش G52E و A158G، وبررسی های بیوانفورماتیکی مربوطه، ژن صناعی در وکتور بیانی تهیه گردیده و صحت آن مورد مطالعه قرار گرفت. سازه ژنی dtxA pET28a/ به میزبان بیانی E.Coli Bl21 DE3 منتقل گردید. سپس بیان و تولید پروتئین نوترکیب حاصل به عنوان کاندید واکسن، با کمک وسترن‌بلات مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج بیوانفورماتیکی حاصل از بهینه‌سازی کدون‌های ژن زیرواحد A دیفتریاتوکسین منجر به سفارش و تهیه ژن صناعی جهش یافته این زیرواحد در وکتور بیانی گردید. آنالیز این ژن در این وکتور با کمک واکنش هضم آنزیمی و الکتروفورز، صحت آن را تائید نمود. پس از بیان و تولید پروتئین نوترکیب ، این پروتئین با وسترن‌بلات تایید‌ گردید. بحث و نتیجه‌گیری: با توجه به مزیت‌های پروتئین نوترکیب DTxA به توکسوئید دیفتری به نظر می‌آید پروتئین نوترکیب حاصل می‌تواند جایگزینی مناسب به عنوان کاندید واکسن علیه دیفتریاتوکسین قرار گیرد که نیازمند مطالعات بیشتر می‌باشد.

واژه‌های کلیدی: کورینه باکتریوم دیفتریه، دیفتریاتوکسین، پروتئین زیرواحدDTxA، ژن dtxA، واکسن نوترکیب
متن کامل [PDF 723 kb]   (2788 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی
دریافت: 1392/2/2 | پذیرش: 1392/8/27 | انتشار: 1392/8/27
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Olad G R. Designing and bioinformatics study of synthetic mutated Diphtheria toxin (dtxA) catalytic domain gene and survey of its recombinant protein exprassion as vaccine candidate. Journal of Ilam University of Medical Sciences 2013; 21 (5) :160-171
URL: http://sjimu.medilam.ac.ir/article-1-973-fa.html

اولاد غلامرضا. طراحی و مطالعه بیوانفورماتیکی ژن صناعی موتانت زیرواحد کاتالیتیک دیفتریاتوکسین (dtxA). مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام 1392; 21 (5) :171-160

URL: http://sjimu.medilam.ac.ir/article-1-973-fa.html



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 21، شماره 5 - ( مهر ماه 1392 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام Journal of Ilam University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.14 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 4541