Journal of Ilam University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام
J. Ilam Uni. Med. Sci.
Medical Sciences
http://sjimu.medilam.ac.ir
96
journal96
1563-4728
2588-3135
doi
fa
jalali
1398
10
1
gregorian
2020
1
1
27
6
online
1
fulltext
other
اندازه گیری پارامترهای سینتیکی استیل کولین استراز مغز گاو و مهار آنزیم
در مجاورت عصاره کوتکوتهpulegium L.) Mentha)
Evaluation of Kinetic Parameters of Acetylcholinesterase
from the Bovine Brain and its Inhibition
with Mentha pulegium L. Extract
<strong><em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مقدمه:</span></span></em></strong> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">عملکرد آنزیم استیل کولین استراز، تسریع فرآیند هیدرولیز استیل کولین است و حافظ هموستاز این انتقال دهنده عصبی، در سیستم اعصاب مرکزی و محیطی می باشد. با توجه به این که در بیماری هایی هم چون آلزایمر سطح انتقال دهنده عصبی، استیل کولین کاهش می یابد، بنا بر این امروزه یکی از روش های جلوگیری از پیشرفت این بیماری تجویز داروهای مهارکننده آنزیم استیل کولین استراز می</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">باشد. دستیابی به داروهایی با اثرات جانبی کمتر به خصوص با منشاء گیاهی هدف بسیاری از محققین می باشد. ﻫﺪف از اﻧﺠﺎم ایـﻦ ﭘـﮋوﻫﺶ بررسی تاثیر عصاره متانولی برگ گیاه کوتکوته</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">بر میزان ﻓﻌﺎﻟﯿﺖ آنزیم استیل کولین استراز می باشد.</span></span><br>
<strong><em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش ها:</span></span></em></strong> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">در این پژوهش آنزیم استیل کولین استراز از مغز گاو با استفاده از روش های هموژنیزاسیون، سانتریفیوژ، رسوب دهی با آمونیوم سولفات و دیالیز در دمای 4 درجه سانتی گراد، به صورت نسبی جداسازی شد. سرعت تولید تیوکولین از استیل تیوکولین یداید به روش المن اندازه گیری شد. در ادامه عصاره متانولی برگ گیاه کوتکوته به روش خیساندن</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">تهیه گردید. سپس اثر مهاری عصاره بر روی آنزیم استیل کولین استراز مورد سنجش قرار گرفت.</span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:13.0pt;"></span></span><br>
<strong><em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته های پژوهش:</span></span></em></strong> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">در این تحقیق فعالیت کل و فعالیت ویژه استیل کولین استراز جداسازی شده از مغز گاو</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">U </span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> 78<sub>/</sub>1143</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">U/mg</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> 10<sub>/</sub>4</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">تعیین شد.</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">pH </span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> بهینه آنزیم 5<sub>/</sub>7 و دمای بهینه آن 45 درجه سانتی گراد به دست آورده شد. مقادیر </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">K<sub>m</sub></span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">V<sub>max</sub></span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> آنزیم به ترتیب برابر 49<sub>/</sub>6 میلی مولار و 88<sub>/</sub>59 میلی مولار بر دقیقه به دست آورده شد. </span></span><br>
<strong><em><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">بحث و نتیجه گیری:</span></span></em></strong> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج این مطالعه نشان داد که عصاره متانولی در غلظت </span></span> <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">mg/ml</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">66<sub>/</sub>26 اثرات قابل توجهی بر فعالیت این آنزیم دارد. با توجه به نتایج به دست آمده، این عصاره می تواند به صورت مهار مختلط باعث مهار </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">AchE</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> شود. بنا بر این برگ گیاه کوتکوته می تواند توسط محققان در زمینه مطالعه و بررسی داروها مورد توجه قرار گیرد.</span></span><br>
<em>Introduction:</em> The function of acetylcholinesterase accelerates the acetylcholine hydrolysis process and protects the hemostasis of this neurotransmitter in the central nervous system and the peripheral tissues. Due to the fact that in diseases, such as Alzheimer's disease, the level of acetylcholine is reduced, the administration of acetylcholinesterase inhibitor drugs (AChEID) is one of the methods for preventing the progression of this disease. The majority of the researchers attempted to investigate drugs with lower side effects, especially from herbal sources. The aim of this study was to investigate the effect of methanol extract of Mentha pulegium leaves on the enzyme activity of AChE.<br>
<br>
<em>Materials & Methods:</em> In this study the AChE enzyme was partially isolated from the bovine brain using homogenization, centrifugation, ammonium sulfate precipitation, and dialysis at 4 ºC. The rate of production of thiocholine from acetylthiocholine iodide was measured according to Ellman's method. Subsequently, the methanolic extract of Mentha pulegium leaves was prepared by the maceration method. Then the inhibitory effect of the extract on the AChE was measured. <em>Ethics code: IR.umz.rec 1397.090</em><br>
<br>
<br>
<em>Findings:</em> The total activity and specific activity of the partially purified AChE were determined as 1143.78 U and 4.10 U/mg, respectively. The optimum pH and temperature of the acetylcholinesterase were determined to be 7.5 and 45°C respectively. Moreover, the Km and Vmax of this enzyme were estimated at 6.49 mM and 59.88 mM/min.<br>
<br>
<em>Discussion & Conclusions:</em> The results of this study showed that the methanolic extract with a concentration of 26.66 mg/ml had significant effect on the activity of this enzyme. According to the results, this extract can inhibit the AchE in form of mixed inhibition. Therefore, Mentha pulegium leaf could be considered by the researchers in study and investigation of pharmaceutics.<br>
استیل کولین استراز, مهار مختلط, عصاره متانولی, کوتکوته
Acetylcholinesterase, Mixed inhibition, Methanolic extract, Mentha pulegium L
74
87
http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-5580-2&slc_lang=other&sid=1
Maryam
Mohadjerani
مریم
مهاجرانی
m.mohajerani@umz.ac.ir
9600319475328460041165
9600319475328460041165
Yes
Department of cell and molecular biology, Faculty of basic sciences, University of Mazandaran, Babolsar, Iran
گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه مازندران، بابلسر، ایران
Arezo
Rasolizadeh
آرزو
رسولی زاده
9600319475328460041166
9600319475328460041166
No
Dept of Molecular and Cell Biology, Faculty of Basic Sciences, University of Mazandaran, Babolsar, Iran
گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه مازندران، بابلسر، ایران