Journal of Ilam University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام
J. Ilam Uni. Med. Sci.
Medical Sciences
http://sjimu.medilam.ac.ir
96
journal96
1563-4728
2588-3135
doi
fa
jalali
1399
7
1
gregorian
2020
10
1
28
4
online
1
fulltext
fa
بررسی تاثیر کشت هم جوار باکتری لاکتوباسیلوس رامنوز بر میزان بیان
ژن های casp3و bax در سلول های سرطانی کولون HT29
The Study of Expression of Casp3/Bax Genes in HT29
Colon Cancer Cell Line with Lactobacillus
rhamnosus Co-Culturing
میکروبشناسی
Microbiology
پژوهشي
Research
<strong><em><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مقدمه:</span></span></em></strong> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">سرطان کولون در کشورهای توسعه یافته شیوع یافته است. باکتری های پروبیوتیک، نقش مهمی در کاهش ابتلا به سرطان کولون و درمان سرطان کولون را می توانند ایفا کنند هدف از این مطالعه بررسی تاثیر کشت هم جوار باکتری لاکتوباسیلوس رامنوز بر میزان بیان ژن های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">casp3</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">bax</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> در سلول های سرطانی است.</span></span><br>
<strong><em><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش ها:</span></span></em></strong> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">در این مطالعه تجربی آزمایشگاهی پس از کشت باکتری ها، مایع رویی و عصاره باکتریایی تهیه شده و سلول ها توسط این مواد تیمار شدند. اثرات سمیت سلولی عصاره سلول باکتری روی رده سلولی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> HT29</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">با استفاده از روش</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT </span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> بررسی شد. پس از استخراج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> RNA</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">و تهیه</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">cDNA </span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">، میزان بیان ژن های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">bax</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> casp3</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">در رده سلولی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> HT29</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">با استفاده از روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Real Time PCR</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> مورد بررسی قرار گرفت.</span></span><br>
<strong><em><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته های پژوهش:</span></span></em></strong> <span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج آزمایش</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT </span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> نشان داد که لاکتوباسیلوس رامنوز در غلظت 10 میکروگرم بر میلی لیتر باعث کاهش بقای سلول </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">HT-29</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> به میزان 32/8</span></span><span style="font-family:Cambria,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">±</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">49/51 درصد شد و نتایج رنگ آمیزی دپی نشان داد تیمار سلول های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> HT29</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">با باکتری لاکتوباسیلوس رامنوز باعث تغییرات کیفی آپــــوپتوز سلـــولی می شود. نتایج</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> Real time PCR </span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">نشان داد که باکتری های لاکتوباسیلوس رامنوز سبب افزایش معنی دار بیان ژن های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">bax</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> (22/0</span></span><span style="font-family:Cambria,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">±</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">2/4) و</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> casp3</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">(12/0</span></span><span style="font-family:Cambria,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">±</span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">88/6</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> (</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">در مقایسه با ژن کنترل در سلول های سرطانی کولون </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">HT29</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> شد(</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">P<0.05</span></span></span><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">).</span></span><br>
<strong><em><span dir="RTL"><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> بحث و نتیجه گیری:</span></span></span></em></strong> <span dir="RTL"><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج این مطالعه نشان داد که باکتری های لاکتوباسیلوس رامنوز میزان بیان ژن </span></span></span><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">bax,</span></span><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> cas3</span></span> <span dir="RTL"><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">را ا</span></span></span><span dir="RTL"><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">فزایش</span></span></span><span dir="RTL"><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;"> داده و سبب القای آپوپتوز در رده سلولی </span></span></span><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> HT29</span></span><span dir="RTL"><span style="font-family:B Mitra;"><span style="font-size:10.0pt;">می شود. بنا بر این با انجام مطالعه های بیشتر می توان از این باکتری به عنوان یک محصول پروبیوتیک ضد سرطان در درمان و پیشگیری از سرطان کولون استفاده نمود.</span></span></span>
<em>Introduction:</em> Colon cancer has spread to developed countries. Probiotic bacteria can play an important role in reducing cancer and treating colon cancer. The aim of this study was to determine the effect of adjacent bovine Lactobacillus rhamnose culture on the expression of casp3 and bax genes in cancer cell.<br>
<br>
<em>Materials & Methods: </em>In this experimental study after bacterial culture, supernatant and bacterial extract were prepared and the cells were treated with these materials. The effects of cell cytotoxicity of the cell line on the HT29 cell line were investigated using MTT method. After extraction of RNA and preparation of cDNA, the expression of bax, casp3 genes in the HT29 cell line was investigated using Real Time PCR.<br>
<br>
<em>Findings:</em> The results of MTT assay showed that Lactobacillus ramnose at a concentration of 10 μg/ml reduced the survival of HT-29 cells by 51.49±8.32%, and the coloring results detection showed that treatment of HT29 cells with Lactobacillus rhamnosis caused qualitative changes in cell apoptosis. Real-time PCR results showed that lactobacillus rhamnose bacteria significantly increased the expression of bax genes (4.2±0.22) and casp3 (6.88±0.92) compared to control gene in cancer cells of the HT29 colon (P<0.05).<br>
<br>
<em> Discussion & Conclusions: </em>The results of this study showed that lactobacillus ramose bacteria increase the expression of bax, cas3 gene and cause induction of apoptosis in HT-29 cell line. Therefore, further studies can be used as an anti-cancer probiotic product in the treatment and prevention of colon cancer.
سرطان کولون, بیان ژن, لاکتوباسیلوس رامنوز
Colon cancer, Gene expression, Lactobacillus rhamnose
25
35
http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4906-3&slc_lang=fa&sid=1
Anahita
ZibasazTalebi
آناهیتا
زیبا سازطالبی
9600319475328460042266
9600319475328460042266
No
Dept of Microbiology, Ahar Branch, Islamic Azad University, Ahar, Iran
گروه میکروبیولوژی، واحد اهر، دانشگاه آزاد اسلامی، اهر، ایران
Changiz
Ahmadizadh
چنگیز
احمدی زاده
dr_ahmadizadeh@yahoo.com
9600319475328460042267
9600319475328460042267
Yes
Dept of Microbiology, Ahar Branch, Islamic Azad University, Ahar, Iran
گروه میکروبیولوژی، واحد اهر، دانشگاه آزاد اسلامی، اهر، ایران